1. Što je kultura stanica?
Kultura stanica odnosi se na uklanjanje stanica iz životinja ili biljaka i njihov zatim uzgoj u povoljnom umjetnom okruženju.Stanice se mogu uzeti izravno iz tkiva i razgraditi enzimskim ili mehaničkim sredstvima prije uzgoja ili se mogu izvesti iz uspostavljenih staničnih linija ili staničnih linija.
2. Što je primarna kultura?
Primarna kultura odnosi se na fazu kulture nakon što se stanice odvoje od tkiva i proliferiraju pod odgovarajućim uvjetima dok ne zauzmu sve dostupne supstrate (to jest, ne dostignu konfluenciju).U ovoj fazi, stanice se moraju supkultivirati prenošenjem u novi spremnik sa svježim medijem za rast kako bi se osiguralo više prostora za nastavak rasta.
2.1 Stanična linija
Nakon prve subkulture, primarna kultura se naziva stanična linija ili subklon.Stanične linije izvedene iz primarnih kultura imaju ograničen životni vijek (tj. ograničene su; vidi dolje), a kako prolaze, dominiraju stanice s najvećim kapacitetom rasta, što rezultira određenim stupnjem genotipa u populaciji koji je u skladu s fenotipom.
2.2 Stanični soj
Ako je subpopulacija stanične linije pozitivno odabrana iz kulture kloniranjem ili nekom drugom metodom, stanična linija bi postala stanični soj.Stanični sojevi obično dobivaju dodatne genetske promjene nakon početka roditeljske linije.
3. Ograničene i kontinuirane stanične linije
Normalne stanice obično se dijele samo ograničen broj puta prije nego što izgube sposobnost proliferacije.Ovo je genetski determiniran događaj koji se naziva starenje;te se stanične linije nazivaju konačnim staničnom linijom.Međutim, neke stanične linije postaju besmrtne kroz proces koji se naziva transformacija, a koji se može dogoditi spontano ili može biti induciran kemikalijama ili virusima.Kada konačna stanična linija prođe transformaciju i stekne sposobnost neograničene diobe, postaje kontinuirana stanična linija.
4. Stanje kulture
Uvjeti uzgoja svake vrste stanica vrlo su različiti, no umjetno okruženje za uzgoj stanica uvijek se sastoji od odgovarajućeg spremnika koji sadrži sljedeće:
4.1 Supstrat ili medij kulture koji osigurava esencijalne hranjive tvari (aminokiseline, ugljikohidrate, vitamine, minerale)
4.2 Čimbenici rasta
4.3 Hormoni
4.4 Plinovi (O2, CO2)
4.5 Regulirano fizičko i kemijsko okruženje (pH, osmotski tlak, temperatura)
Većina stanica ovisi o usidrenju i moraju se uzgajati na čvrstom ili polučvrstom supstratu (adherentna ili jednoslojna kultura), dok druge stanice mogu rasti plutajući u mediju (suspenzijska kultura).
5. Krioprezervacija
Ako u potkulturi ima viška stanica, potrebno ih je tretirati odgovarajućim zaštitnim sredstvom (kao što je DMSO ili glicerol) i pohraniti na temperaturi ispod -130°C (krioprezervacija) dok ne budu potrebne.Za više informacija o subkulturi i krioprezervaciji stanica.
6.Morfologija stanica u kulturi
Stanice u kulturi mogu se podijeliti u tri osnovne kategorije na temelju njihovog oblika i izgleda (tj. morfologije).
6.1 Stanice fibroblasta su bipolarne ili multipolarne, izduženog su oblika i rastu pričvršćene za podlogu.
6.2 Stanice slične epitelu su poligonalne, imaju pravilniju veličinu i pričvršćene su na matriks u diskretnim listovima.
6.3 Stanice slične limfoblastu su sferične i obično rastu u suspenziji bez pričvršćivanja na površinu.
7.Primjena kulture stanica
Kultura stanica jedan je od glavnih alata koji se koristi u staničnoj i molekularnoj biologiji.Pruža izvrstan sustav modela za proučavanje normalne fiziologije i biokemije stanica (kao što su metabolička istraživanja, starenje), učinaka lijekova i toksičnih spojeva na stanice te mutageneze i kancerogenih učinaka.Također se koristi za ispitivanje i razvoj lijekova te veliku proizvodnju bioloških spojeva (kao što su cjepiva, terapijski proteini).Glavna prednost korištenja stanične kulture za bilo koju od ovih primjena je dosljednost i ponovljivost rezultata koji se mogu dobiti uporabom serije kloniranih stanica.
Vrijeme objave: 3. lipnja 2019