1.Odabir prave stanične linije
Prilikom odabira odgovarajuće stanične linije za vaš eksperiment, razmotrite sljedeće kriterije:
a.Vrste: Stanične linije koje nisu ljudske i koje nisu primati obično imaju manje ograničenja biološke sigurnosti, ali na kraju će vaš eksperiment odrediti treba li koristiti kulturu određene vrste.
b. Značajke: Koja je svrha vašeg eksperimenta?Na primjer, stanične linije izvedene iz jetre i bubrega mogu biti prikladnije za ispitivanje toksičnosti.
c. Ograničeno ili kontinuirano: Iako vam izbor iz ograničene stanične linije može pružiti više mogućnosti za izražavanje točne funkcije, kontinuirane stanične linije općenito je lakše klonirati i održavati.
d. Normalne ili transformirane: Transformirane stanične linije obično imaju veću stopu rasta i veću učinkovitost zasijavanja, kontinuirane su i zahtijevaju manje seruma u mediju kulture, ali je njihov fenotip prošao trajne promjene kroz genetsku transformaciju.
e. Uvjeti i karakteristike rasta: Koji su vaši zahtjevi za brzinu rasta, gustoću zasićenja, učinkovitost kloniranja i sposobnost rasta suspenzije?Na primjer, za ekspresiju rekombinantnih proteina u visokim prinosima, možda ćete morati odabrati stanične linije koje imaju brze stope rasta i sposobnost rasta u suspenziji.
f. Ostali kriteriji: Ako koristite ograničenu staničnu liniju, ima li dovoljno dostupnih zaliha?Je li stanična linija potpuno karakterizirana ili to morate sami provjeriti?Ako koristite abnormalnu staničnu liniju, postoji li ekvivalentna normalna stanična linija koja se može koristiti kao kontrola?Je li stanična linija stabilna?Ako nije, koliko ga je lako klonirati i generirati dovoljno smrznute zalihe za vaš eksperiment?
2. Dobiti stanične linije
Možete izgraditi svoju vlastitu kulturu od primarnih stanica ili možete odlučiti kupiti utvrđene stanične kulture od komercijalnih ili neprofitnih dobavljača (tj. banaka stanica).Renomirani dobavljači pružaju visokokvalitetne stanične linije koje su pažljivo ispitane u pogledu integriteta i osiguravaju da kultura ne sadrži kontaminante.Preporučamo da ne posuđujete kulture iz drugih laboratorija jer postoji visok rizik od kontaminacije stanične kulture.Bez obzira na izvor, provjerite jesu li sve nove stanične linije testirane na kontaminaciju mikoplazmom prije nego što ga počnete koristiti.
Vrijeme objave: 1. veljače 2023